日本血吸虫核糖体蛋白S4基因的克隆、表达、纯化及免疫诊断价值的初步研究

• 作者: 何卓 余路新 汪世平 陈秀春 高冬梅
• 来源期刊: 中华预防医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 血吸虫,日本 重组蛋白质类 核糖体蛋白质类 免疫学试验
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 500-504
• 分类号: R5
• 字数: 4147字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-9624.2010.06.007

摘要

目的 体外重组日本血吸虫核糖体蛋白S4(SjRPS4),并评价其在日本血吸虫病免疫诊断中的应用价值.方法 从日本血吸虫尾蚴cDNA文库获得了SjRPS4蛋白相关基因,将该段基因克隆入pQE30表达载体并转化到大肠杆菌M15中,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导融合蛋白表达.融合蛋白经Ni2+-NTA树脂柱进行亲和层析纯化,并通过十二烷基磺酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定蛋白反应,通过Western blot和ELISA对其免疫原性进行鉴定.结果 成功构建了pQE30/SjRPS4重组菌.重组菌诱导培养后,SDS-PAGE电泳分析可见在相对分子质量约30×103处有SjRPS4融合蛋白的表达,经纯化获得纯度达90%以上的表达蛋白.Western blot检测结果表明该重组蛋白能被日本血吸虫病患者血清识别.用ELISA法检测疑似血吸虫病患者血清,敏感性为90.91%(70/77),特异性为92.59%(25/27),SjRPS4重组表达蛋白阳性率为67.30%(70/104),与肺吸虫病患者血清无交叉反应.结论 成功克隆表达了SjRPS4蛋白,初步证实了SjRPS4在诊断血吸虫病中具有良好的应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汪世平	中南大学湘雅医学院血吸虫病免疫与传播控制重点实验室	88	599	12.0	19.0
2	何卓	中南大学湘雅医学院血吸虫病免疫与传播控制重点实验室	14	101	7.0	9.0
3	高冬梅	中南大学湘雅医学院血吸虫病免疫与传播控制重点实验室	18	138	6.0	11.0
4	余路新	中南大学湘雅医学院血吸虫病免疫与传播控制重点实验室	8	53	4.0	7.0
5	陈秀春	中南大学湘雅医学院血吸虫病免疫与传播控制重点实验室	4	58	4.0	4.0