亲环素A基因在非小细胞肺癌中的功能

• 作者: 冯艳铭 吴卫东 吴逸明 徐正顺 燕贞
• 来源期刊: 中华劳动卫生职业病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 慢病毒感染 基因 癌 非小细胞肺 细胞周期
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 87-91
• 页数: 5页
• 分类号: R9
• 字数: 4760字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9391.2010.02.003

摘要

目的 研究亲环素A(CyPA)基因在非小细胞肺癌中的功能.方法 设计并合成4对针对CyPA siRNA靶序列的寡核苷酸单链,退火形成双链DNA,与经Hpal和Xhol酶切后的pGCL-GFP载体连接产生Lv-shCyPA慢病毒载体,该载体含U6启动子和绿色荧光蛋白(GFP),经聚合酶链反应(PCR)筛选阳性克隆并测序鉴定.将Lv-shCyPA、pHelper1.0和pHelper2.0质粒共感染包装细胞293T细胞,包装成假病毒颗粒并感染非小细胞肺癌A549细胞,经免疫印迹法(Western blot)检测筛选CyPAsiRNA有效靶点和慢病毒颗粒,采用流式细胞技术分析细胞周期和凋亡率,进行裸鼠移植瘤实验.结果 PCR和测序结果证实,Lv-shCyPA慢病毒载体构建正确,经Western blot法筛选最有效的CyPA siRNA病毒颗粒滴度为2×10 9TU/ml,感染A549细胞凋亡率(5.01%±0.57%)增加,细胞周期G2-M期比例(11.40%±0.68%)减少,裸鼠移植瘤瘤体生长明显减缓,与未感染病毒的A549细胞细胞凋亡率(0.35%±0.17%)及G2-M期比例(14.52%±1.19%)相比,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 CyPA基因沉默在非小细胞肺癌的发生中有一定的抑瘤作用,对非小细胞肺癌的预防和分子流行学研究提供了新的理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴逸明	郑州大学公共卫生学院劳动卫生教研室	201	1078	14.0	20.0
2	冯艳铭	河南科技大学医学院	19	59	4.0	6.0
3	徐正顺	河南科技大学医学院	35	191	8.0	12.0
4	燕贞	郑州大学公共卫生学院劳动卫生教研室	34	121	6.0	8.0
5	吴卫东	美国北卡罗那大学环境医学、哮喘与肺生物学中心	1	2	1.0	1.0