一种简便的DNA定量分子量标准的制备

• 作者: 王文华 葛常辉
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: DNA分子量标准 载体构建 限制性内切酶酶切
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 页码范围: 62-64
• 分类号: Q782
• 字数: 1565字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2010.03.062

摘要

目的:制备一种具有琼脂糖凝胶电泳定量功能的DNA分子量标准.方法:以pMD180-T Simple载体为基础骨架构建了长度为4.7 kb的质粒,应用定点突变的方法,在载体上分别间隔100 bp、200 bp、400 bp、800 bp、1 200 bp处,加入了Hind Ⅲ限制性内切酶的酶切位点,将该质粒扩增后并应用Hind Ⅲ酶切后,1.5%琼脂糖凝胶电泳鉴定.结果:获得的分子量条带大小依次为100 bp、200 bp、400 bp、800 bp、1200 bp和2000 bp,每次使用4μl可获得质量范围为10 ng、20 ng、40 ng、80 ng、120 ng和200 ng的定量标准品.结论:应用该方法制备标准品,具有制备简单、成本低、定量快速等优点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	葛常辉	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	10	24	3.0	4.0
2	王文华		3	16	3.0	3.0