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摘要:
[目的]肠炎型沙门菌是一种食源性人畜共患病病原菌,可在禽蛋中存活并传播.sRNA为新近发现的基因表达调控分子,本实验以sRNA(sraB)为对象,探索sRNA与肠炎型沙门菌在禽蛋中存活的相关性,及研究其在细菌抵抗蛋清抑菌作用中的调控功能.[方法]参考已报道的沙门菌全基因组及sraB序列,设计并扩增sraB突变用基因片段,运用Red重组系统(red recombination system)对肠炎沙门菌野生株(SE2472)sraB基因进行定点敲除,构建出sraB敲除株(SE2472ΔsraB).分析比较sraB敲除对沙门菌在蛋清中存活的影响;另构建表达sraB的回复表达质粒pHDB3-sraB,将其转入sraB敲除株构建回复株SE2472AsraB-comp,以回复表达sraB,分析sraB表达对沙门菌敲除株的回复作用;并分别以野生株、敲除株及回复株研究sraB在抵抗蛋清中几种抑菌因子(如溶菌酶和卵转铁蛋白)作用中可能的调控作用.[结果]敲除株在蛋清中存活率为野生型的61%-70%,回复株相比野生型的存活率比敲除株提高10%-33%;在转铁蛋白抑菌实验中,孵育8 h和24 h,敲除株的存活率分别为野生型存活率的38%和23%,孵育8 h回复株相比野生型的存活率比敲除株提高15%,但孵育24 h回复株的存活率未见提高;在溶菌酶抑菌实验中,孵育8 h和24 h后,敲除株存活率分别为野生型的41%和27%,回复株相比野生型的存活率分别比敲除株提高35%和23%.[结论]通过比较sraB敲除与否,研究肠炎型沙门菌在禽蛋中的存活及对抑菌因子的抵抗作用,结果表明sraB在肠炎沙门菌抵抗蛋清抑菌作用中起着重要调控功能.
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文献信息
篇名 非编码小RNA(sraB)调控肠炎型沙门菌的抗蛋清抑菌作用
来源期刊 微生物学报 学科 医学
关键词 沙门菌 sRNA 基因调控 蛋清
年,卷(期) 2010,(11) 所属期刊栏目
研究方向 页码范围 1537-1544
页数 分类号 R37
字数 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 曾科 南京大学生命科学学院医药生物技术国家重点实验室 10 23 3.0 4.0
2 蒋惠源 南京大学生命科学学院医药生物技术国家重点实验室 1 11 1.0 1.0
3 曹鸣辉 南京大学生命科学学院医药生物技术国家重点实验室 2 11 1.0 2.0
4 曹学松 南京大学生命科学学院医药生物技术国家重点实验室 1 11 1.0 1.0
5 顾宏伟 南京大学生命科学学院医药生物技术国家重点实验室 3 20 3.0 3.0
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