水稻条纹病毒胁迫下灰飞虱基因的差异表达

• 作者: 吴祖建 肖冬来 谢联辉 谢荔岩 邓慧颖
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 灰飞虱 水稻条纹病毒 差异表达基因 DDRT-PCR 正交试验
• 年，卷（期）: 2010,（8）
• 页码范围: 914-919
• 分类号: Q965.8
• 语种: 中文

摘要

水稻条纹病毒(rice stripe virus,RSV)主要由介体昆虫灰飞虱Laodelphax striatellus以循回增殖型方式经卵传播,目前RSV与灰飞虱间的瓦作研究很少.为了研究RSV侵染对灰飞虱基因表达的影响,采用5条随机引物和3条锚定引物,利用mRNA差异显示(differential display RT-PCR,DDRT-PCR)技术分析了带毒和无毒灰飞虱种群基因表达差异.且利用正交实验优化了DDRT-PCR反应体系中的模板浓度、锚定引物浓度、随机引物浓度、dNTPs浓度、镁离子浓度及Taq酶用量.结果表明:最佳DDRT-PCR体系(25 μL)为cDNA 3.0 μg,随机引物2.0 μmol/L,锚定引物2.5 μmoL/L,dNTPs 200 μmol/L,Mg2+2.0 μmoL/L,Taq酶2.0 U.mRNA差异显示共获得35条差异片段,选取其中6条经RNA斑点杂交验证,获得了4条阳性差异片段.其中3条阳性片段为带毒灰飞虱种群特异表达,分别与5-羟色胺受体1D、旋转酶B、60S核蛋白L40高度同源,无毒厌飞虱种群中特异表达的一条阳性片段在NCBI核酸数据库中比对无同源序列.DDRT-PCR优化体系的建市及部分筹异片段的获得为进一步研究灰飞虱与RSV间的互作提供了帮助.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢联辉	福建农林大学植物病毒研究所福建省植物病毒学重点实验室	184	3024	29.0	43.0
2	吴祖建	福建农林大学植物病毒研究所福建省植物病毒学重点实验室	166	2128	26.0	36.0
3	谢荔岩	福建农林大学植物病毒研究所福建省植物病毒学重点实验室	45	610	17.0	23.0
4	肖冬来	福建农林大学植物病毒研究所福建省植物病毒学重点实验室	5	32	2.0	5.0
6	邓慧颖	福建农林大学植物病毒研究所福建省植物病毒学重点实验室	4	16	2.0	4.0