天冬氨酸作为非特异性吸附抑制剂在二氧化钛选择性富集磷酸肽中的应用

• 作者: 卢庄 宋丽娜 张养军 毕炜 蔡耘 贾伟 迟明 钱小红
• 来源期刊: 色谱
• 学科: 化学
• 关键词: 二氧化钛 富集 非特异性吸附抑制剂 天冬氨酸 磷酸肽 鼠肝
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 特别策划:色谱技术在蛋白质组学研究中的应用
• 页码范围: 152-157
• 页数: 6页
• 分类号: O658
• 字数: 5766字
• 语种: 中文

摘要

二氧化钛富集法作为目前使用最为广泛的金属氧化物富集磷酸肽的方法,在富集过程中常常对富含天冬氨酸和谷氨酸的酸性非磷酸化肽段存在一定的非特异性吸附作用.这些肽段与磷酸化肽段一同被富集,降低了磷酸肽富集的选择性.传统方法中使用的非特异性吸附抑制剂常会对质谱的电喷雾离子源造成污染,因而限制了其在液相色谱-质谱联用(LC-MS)系统中的应用.本研究将天冬氨酸作为一种新型的非特异性吸附抑制剂加入到二氧化钛富集体系中,并分别对3种和9种标准蛋白质酶切肽段混合物进行富集实验,同时与添加另一种非特异性吸附抑制剂--谷氨酸以及不添加任何非特异性吸附抑制剂的富集体系进行了富集效果的比较.结果表明,天冬氨酸可以有效地提高二氧化钛对磷酸肽富集的选择性.将添加天冬氨酸的二氧化钛富集体系应用于鼠肝全蛋白质磷酸肽的富集中,同样取得了很好的效果,表明天冬氨酸在复杂的生物样本的磷酸肽富集中也同样具有良好的应用前景.此外,由于天冬氨酸在反相色谱中极易被洗脱去除,从而避免了传统抑制剂对LC-MS系统离子源的污染问题.