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摘要:
目的 了解胰岛素对烧伤血清诱导的血管内皮细胞NF-κB核移位的抑制作用及其相关机制.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC).按照随机数字表法将细胞分为5组:空白对照组,不加任何刺激因素常规培养;正常血清对照组和烧伤血清刺激组,分别用含体积分数20%健康人血清、体积分数20%烧伤患者血清的培养液培养;烧伤血清+胰岛素处理组,在烧伤血清刺激组培养液成分的基础上添加胰岛素(终浓度1×10-7mol/L)进行培养;抑制剂预处理组,预先加入蛋白激酶B(PKB或Akt)特异性抑制剂LY294002(50μmol/L)孵育细胞,30 min后改用培养液(成分同烧伤血清+胰岛素处理组)培养.6 h后,采用扫描电镜观察各组HUVEC损伤情况;用流式细胞仪检测细胞凋亡率;蛋白质印迹法检测细胞胞质磷酸化κB-α抑制蛋白(p-IκB-α)和磷酸化Akt(p-Akt)水平,以及胞核NF-κB-p65的蛋白表达变化.结果 (1)扫描电镜观察:与空白对照组HUVEC比较,烧伤血清刺激组、抑制剂预处理组细胞收缩明显,细胞间呈锯齿状连接或连接消失,胞核结构不规整.正常血清对照组及烧伤血清+胰岛素处理组细胞结构有轻微改变,但细胞延展性及胞核结构明显好于烧伤血清刺激组.(2)细胞凋亡率:空白对照组为(15.7±2.2)%.烧伤血清刺激组为(28.5±2.3)%,烧伤血清+胰岛素处理组为(22.3±1.8)%,抑制剂预处理组为(29.7±2.4)%,均明显高于空白对照组(F=14.288,P<0.05或P<0.01);正常血清对照组细胞凋亡率为(17.0±2.5)%,与空白对照组比较差异无统计学意义(F=14.288,P>0.05).与烧伤血清刺激组相比,烧伤血清+胰岛素处理组细胞凋亡率明显降低(F=14.288,P<0.05).(3)蛋白表达水平:与空白对照组相比,烧伤血清刺激组和抑制剂预处理组细胞胞质p-IκB-α与胞核NF-κB-p65的蛋白表达水平明显升高,p-Akt表达水平明显下降;正常血清对照组和烧伤血清+胰岛素处理组3种蛋白水平均与空白对照组接近.结论 胰岛素通过调节磷脂酰肌醇3激酶/Akt信号通路抑制IκB-α磷酸化,继而限制NF-κB核移位,最终发挥改善内皮细胞功能的作用.
内容分析
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文献信息
篇名 胰岛素对烧伤血清诱导血管内皮细胞核因子κB核移位的抑制作用
来源期刊 中华烧伤杂志 学科 医学
关键词 烧伤 胰岛素 内皮细胞 NF-κB
年,卷(期) 2010,(3) 所属期刊栏目 烧伤早期并发症与处理
研究方向 页码范围 175-179
页数 分类号 R6
字数 4195字 语种 中文
DOI 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2010.03.003
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 朱雄翔 第四军医大学西京医院烧伤与皮肤外科 53 342 11.0 14.0
2 胡大海 第四军医大学西京医院烧伤与皮肤外科 165 1002 15.0 20.0
3 董茂龙 第四军医大学西京医院烧伤与皮肤外科 34 161 7.0 10.0
4 吕根法 第四军医大学西京医院烧伤与皮肤外科 9 46 4.0 6.0
5 张万福 第四军医大学西京医院烧伤与皮肤外科 17 49 5.0 6.0
6 徐成峰 第四军医大学西京医院烧伤与皮肤外科 1 3 1.0 1.0
7 赵周婷 第四军医大学西京医院烧伤与皮肤外科 3 11 2.0 3.0
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1009-2587
50-1120/R
大16开
重庆市沙坪坝区高滩岩正街
78-131
1985
chi
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