斑马鱼Lefty1特异性多克隆抗体的制备

• 作者: 万永奇 刘华友 吴秀山 李帆 李永青 满贤 王跃群 莫小阳 邓云 龚琳
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: lefty1 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 685-689
• 分类号: Q78
• 字数: 3812字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2010.05.022

摘要

Lefty蛋白是TGFβ大家族的配体,通过与Nodal以及Nodal的受体结合而抑制Nodal信号转导.本文采用PCR技术扩增出斑马鱼lefty1基因(z-lefty1)的部分编码区,将其插入到pGEX-4T-1原核表达载体中.所构建的重组质粒(pGEX/z-Lefty1)转化入BL21大肠杆菌,通过IPTG诱导表达GST-z-Lefty1融合蛋白.蛋白经尿素洗涤分离后用于免疫新西兰大白兔以制备多克隆抗体.Western blotting检测结果表明获得了高效价的特异性兔抗z-Lefty1多克隆抗体.这为进一步研究斑马鱼心脏发育的分子机制创造了条件.