金纳米颗粒介导不对称PCR:制备单链核酸的新方法

• 作者: 孟祥贤 王柯敏 羊小海 郭秋平 黄青山
• 来源期刊: 化学学报
• 学科: 化学
• 关键词: 金纳米颗粒 不对称PCR 单链核酸 地中海贫血病
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 917-920
• 分类号: O6
• 语种: 中文

摘要

单链核酸杂交技术是现代医学生物学等领域诊断与检测的重要手段.传统不对称PCR制备单链核酸的方法,需要严格控制引物和模板数量及反复摸索退火温度,操作复杂.发展了一种利用金纳米颗粒介导的不对称PCR快速制备单链核酸的新方法.浓度为0.1～O.5 nmol/L金纳米颗粒可显著改善PCR扩增特异性,提高扩增效率.在不对称PCR扩增中,加入合适浓度的金纳米颗粒方便快捷得到单链核酸产物,不需要进行复杂的条件优化等操作步骤.通过快速制备地中海遗传病两个点突变CD17(A→T)和IVS-2-654(C→T)位点的单链DNA靶序列,证实该方法是一种简便、有效的获得单链核酸的方法,有望在单链核酸技术领域发挥重要作用.