鼻咽癌中EB病毒启动子Qp的突变及其功能学研究

• 作者: 买世娟 刘文举 宗永生 廖奕佶 花文峰 谢丹 邓海霞 黄宇帆
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 鼻咽癌 EB病毒 EB病毒核抗原1 变异型 启动子
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 23-27
• 页数: 5页
• 分类号: R73-3
• 字数: 4256字
• 语种: 中文

摘要

[目的]探讨鼻咽癌细胞中启动EB病毒核抗原1(EBNA1蛋白)表达的EB病毒Q启动子(Qp)的变异特征,比较有第62 225位点(g→a)和第62 422位点(g→c)两个点突变的Qp与原型Qp(B95.8型)的功能学差异及其生物学意义.[方法] 采用PCR的方法扩增29例鼻咽癌组织石蜡标本和14例健康成人外周血标本(总共43例)中的Qp序列,PCR产物测序后分析其突变情况,统计学分析Qp中的点突变与鼻咽癌的相关性.把突变型和原型Qp分别克隆到荧光素酶报告基因载体上,检测相对光强度(RLU),比较突变型与原型Qp启动转录的活性.使用染色质免疫共沉淀(CHIP)实验来比较突变型和原型Qp与Sp1蛋白的亲和力.[结果]通过PCR扩增和测序实验,证实Qp的突变与鼻咽癌有密切的相关性(P=0.0395,<0.05).突变型Qp启动转录的活性明显高于原型(RLU之比约为2.5:1,P<0.05),并且突变型Qp与Sp1的亲和力较原型QP增强约1.52倍.[结论]在鼻咽癌组织中,突变型Qp可能通过增强与Sp1亲和力的机制,使其启动转录的活性明显增强.Qp特定位点的突变在EB病毒对鼻咽上皮细胞的感染和转化过程中可能起了重要的作用.