鸭多杀性巴氏杆菌外膜蛋白A基因表达及抗原性鉴定

• 作者: 刘家森 司昌德 姜骞 孙龚 崔玉东 曲连东 林欢 郭东春 韩凌霞
• 来源期刊: 黑龙江八一农垦大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 多杀性巴氏杆菌 外膜蛋白A 原核表达
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 页码范围: 52-55
• 分类号: S855.1+2
• 字数: 3071字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2090.2010.02.014

摘要

根据已发表的Pm 70株的序列(GenBank登录号:AE004439)设计了两对引物,用PCR方法扩增了鸭多杀性巴氏杆菌标准株C48-102的外膜蛋白基因A(omp A),扩增的片段为1 062 bp.将测序结果与GenBank中多杀性巴氏杆菌P52、PM 70、T931317、194289的omp A序列比对结果表明,核苷酸水平上同源性为89.0%～98.9%;在氨基酸水平上同源性为90.7%～99.2%.全omp A序列在大肠杆菌中干扰蛋白的正常表达,因此截断omp A蛋白的信号肽序列,将去信号肽的omp A基因插入到pPRO-EX-Htb载体上,构建了原核表达载体Htb-omp A,转化BL21,并诱导表达,SDS-PAGE结果表明,表达蛋白约为35 kDa,与预期的分子量大小相符.Western-blot结果表明,表达的蛋白具有良好的抗原活性.本研究重组蛋白omp A的获得,为敲除omp A基因多杀性巴氏杆菌突变株的血清学检测奠定基础.