海藻糖深低温保存外周血造血干细胞的可行性

• 作者: 娄琳 陆志刚
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 低温保存 粒-巨噬细胞集落形成单位 海藻糖 浓度 外周血造血干细胞 生物材料
• 年，卷（期）: 2010,（12）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 2119-2122
• 分类号: R318
• 字数: 5108字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.12.008

摘要

背景:二甲基亚砜是目前造血干细胞深低温保存的经典保护剂,但其对细胞和患者均有一定的毒副作用.海藻糖是一种稳定的无毒副作用的非还原性双糖,已被广泛应用于红细胞、血小板和胚胎等的冷冻保存中.目的:探讨海藻糖作为低温保存造血干细胞保护剂的可行性.方法:外周血造血干细胞经重组人集落刺激因子动员后,用血细胞分离机采集连续单个核细胞,分为0.5 mol/L.海藻糖组、1.0 mol/L海藻糖组、对照组.采用程序降温法液氮保存,冻存7 d后取出,立即置于40℃水浴箱内复苏.锥虫蓝拒染法检测细胞存活率;采用甲基纤维索半固体培养体系进行集落培养,计数粒-巨噬细胞集落形成单位的回收率;采用CD34-PE/CD45-FITC双标法,流式细胞仪检测CD34~+细胞回收率.结果与结论:与对照组比较,0.5,1.0 mol/L海藻糖组细胞存活率、粒巨噬细胞集落形成单位回收率、CD34~+细胞回收率均明显升高(P<0.001),且0.5 mol/L海藻糖组升高幅度尤为显著(P<0.001或P<0.01).证实海藻糖对于短期内低温冻存的外周血造血干细胞有一定保护作用,浓度为0.5 mol/L的海藻糖保护冻存的造血干细胞效果较佳.