定点诱变法构建p53基因多态质粒

• 作者: 刘泽军 蔡云 邱实 顾寿智 高兴
• 来源期刊: 癌变·畸变·突变
• 学科: 生物学
• 关键词: p53多态 定点诱变 重叠延伸PCR
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 182-185
• 分类号: Q781
• 字数: 2532字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-616X.2010.03.006

摘要

目的:为了研究p53 codon 72多态的功能,采用定点诱变法构建人p53基因的多态质粒.方法:设计带有突变碱基的引物,通过PCR扩增引入突变碱基,再将突变后的p53序列插入载体中.经测序确定所扩增的DNA序列,并用体外转录翻译系统制备p53蛋白和iASPP蛋白,免疫沉淀法检测蛋白相互作用.结果:通过PCR获得的含突变碱基的p53序列经连接后插入真核表达载体pReceiver-M01中,构建了p53多态位点为72Arg的表达质粒pReceiver-M01-p53(Arg72).测序证明序列正确,表达的p53蛋白能与iASPP相互作用,具有生物学功能.结论:成功构建了p53多态(72Arg)真核表达载体,为进一步深入研究p53多态的生物学功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邱实	第三军医大学西南医院西南癌症中心	3	1	1.0	1.0
5	蔡云	第三军医大学西南医院西南癌症中心	12	37	4.0	5.0
6	高兴	第三军医大学西南医院西南癌症中心	6	25	3.0	5.0