Red重组系统介导下大肠杆菌改造体系的优化

• 作者: 张穗生 裴建新 郭媛 陈东 韦廷宗 黄志民 黄日波 黎贞崇
• 来源期刊: 广西科学
• 学科: 生物学
• 关键词: Red重组系统 转化条件 诱导条件 复苏条件
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 页码范围: 160-163
• 分类号: Q789
• 字数: 3439字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-9164.2010.02.020

摘要

对Red重组系统介导下大肠杆菌进行遗传改造的转化条件、诱导条件、复苏条件三方面实验参数进行优化研究.结果表明:电转化加入的DNA为20ng,Red重组系统感受态细胞培养浓度为OD600=0.60,所需的电击感受态细胞数为3×108;对大肠杆菌基因做双敲除时,突变第2个基因的阿拉伯糖诱导最适时间比突变首个基因延长,诱导浓度为40μm,复苏时间变化对体系影响不显著.