变异链球菌表面蛋白SpaP P区真核表达质粒的构建及表达

• 作者: 刘建国 曲云鹏 杨德琴 柴巧学 白国辉 管晓燕 韩琪
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 变异链球菌 龋病 疫苗 表面蛋白 pVAX1 真核表达
• 年，卷（期）: 2010,（15）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 2765-2768
• 分类号: R318
• 字数: 4516字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.15.025

摘要

背景:变异链球菌是龋病的主要致龋菌,针对介导变异链球菌非蔗糖依赖性黏附的重要毒力因子SpaP的基因疫苗在理论上能对抗变异链球菌黏附于牙面和进一步破坏牙体硬组织.目的:构建变异链球菌表面蛋白P区(SpaP/P)真核表达质粒pVAX1-spapiP,并观察其在哺乳动物细胞COS.7中的表达.方法:通过基因重组技术,构建真核表达质粒pVAX1-spap/P,并经酶切分析、测序分析鉴定正确后,采用脂质体转染法,将其转染至COS-7细胞中,然后经免疫组织化学SABC法检测其在细胞中的表达.结果与结论:真核表达质粒pVAX1-spap/P经EcoR Ⅰ和Xba Ⅰ双酶切分析,证实携带1.2 kb的目的基因spapiP片段,经测序分析,目的基因正向插入到预先设计的载体位点处.pVAX1-spap/P转染的细胞胞质呈褐色,pVAX1空载体质粒转染的细胞胞质中无着色.证实实验成功构建真核表达质粒pVAX1-spap/P,所携带的基因序列正确,能够在真核细胞COS-7中正确表达目的蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘建国	遵义医学院口腔医学院口腔内科学教研室	128	653	13.0	17.0
2	管晓燕	遵义医学院口腔医学院口腔内科学教研室	39	159	7.0	9.0
3	白国辉	遵义医学院口腔医学院口腔内科学教研室	26	87	6.0	9.0
4	韩琪	遵义医学院口腔医学院口腔内科学教研室	5	8	1.0	2.0
5	柴巧学	遵义医学院口腔医学院口腔内科学教研室	6	46	3.0	6.0
6	曲云鹏	遵义医学院口腔医学院口腔内科学教研室	2	7	1.0	2.0