猪α-1,3-半乳糖转移酶基因打靶载体的构建

• 作者: 季守平 宫锋 常宏宇 李素波 李芳 章扬培 聂亚玲 鲍国强
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: α-Gal表位 猪α-1,3-半乳糖转移酶 基因打靶 异种移植
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 217-221
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 4215字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2010.02.017

摘要

目的:构建猪α-1,3-半乳糖转移酶(GGTA1)基因的正负筛选打靶载体.方法:以原代猪胚胎成纤维细胞基因组DNA为模板,采用长程PCR方法扩增出GGTA1基因的2条片段;以长约2 kb包含部分第9外显子的片段为同源短臂,在Xba Ⅰ和Cla Ⅰ位点插入pLoxP质粒正筛选标记neo基因的3'端;以长约5.4 kb包括部分第8外显子、全部第8内含子及部分第9外显子的片段为同源长臂,于Not Ⅰ位点插入该质粒中neo基因的5'端;2.7 kb的负筛选标记tk基因位于载体中同源短臂的3'端外侧.结果与结论:酶切、PCR及测序结果表明,同源臂被正确连接至质粒pLoxP,成功构建了猪GGTA1基因正负筛选打靶载体pSL/GT.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	章扬培	军事医学科学院野战输血研究所	98	679	13.0	20.0
2	常宏宇	第二炮兵总医院儿科	6	30	3.0	5.0
6	宫锋	军事医学科学院野战输血研究所	47	194	7.0	11.0
7	季守平	军事医学科学院野战输血研究所	41	231	8.0	13.0
8	鲍国强	军事医学科学院野战输血研究所	23	89	5.0	8.0
9	李素波	军事医学科学院野战输血研究所	54	223	7.0	11.0
10	李芳	第二炮兵总医院儿科	11	74	6.0	8.0