利用新型载体运转MDR1 siRNA以逆转胰腺癌化疗耐药性的研究

• 作者: 张太平 李方 李汇华 洪智贤 赵玉沛 郑连芳
• 来源期刊: 外科理论与实践
• 学科: 医学
• 关键词: 胰腺癌化疗 多药物耐药 化疗耐药 RNA干扰 sc-rAAV病毒载体
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 416-422
• 分类号: R735.9
• 字数: 5495字
• 语种: 中文

摘要

目的:以新型载体运转MDR1 siRNA导人胰腺癌细胞株后,观察其多药物耐药基因(MDR1)的表达及其对胰腺癌化疗耐药性的影响.方法:采用RNA干扰技术,构建可用于包装成自我复制rAAV病毒载体的质粒,以运转不同长度的MDR1 siRNA.采用实时PCR检测MDR1 mRNA的表达,Western印迹法检测总P-糖基化蛋白(P-gp)的表达水平,用流式细胞仪检测细胞表面的P-gp表达,并从不同层面检测胰腺癌细胞株P-gp表达的抑制率,从而筛选出最佳的质粒载体.采用MTT检测IC50值,进行各载体逆转胰腺癌细胞株化疗耐药性的研究.结果:拟用于构建自我复制rAAV病毒载体的25-mer MDR1 siRNA质粒能有效地将目的基因MDR1 siRNA导入胰腺癌细胞株,并予稳定的表达,发挥作用.导入胰腺癌细胞株的MDR1 siRNA能有效地在mRNA水平上沉默MDR1基因,显著抑制其表达,使其蛋白产物P-gp的表达明显减少,及其在细胞膜上的数量显著降低.结果能有效、显著地逆转胰腺癌细胞株的化疗耐药性,转染前SW1990/ADM细胞对ADM的IC50值约是转染后的50倍.结论:采用可用于构建新型sc-rAAV载体的质粒作为投递siRNA的工具,并选择MDR1为研究靶点,通过实验证实该策略在逆转胰腺癌化疗耐药性中的有效性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵玉沛	中国医学科学院北京协和医院外科	192	1465	19.0	28.0
2	李方	中国医学科学院北京协和医院核医学科	49	148	8.0	10.0
3	张太平	中国医学科学院北京协和医院外科	90	535	12.0	18.0
4	李汇华	中国医学科学院北京协和医院基础所病理科	7	44	4.0	6.0
5	郑连芳	中国医学科学院北京协和医院核医学科	4	34	2.0	4.0
6	洪智贤	中国医学科学院北京协和医院外科	2	2	1.0	1.0