油菜RNA干扰(RNAi)文库的构建

• 作者: 单长民 武玉永 谭秀华 马立新
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: RNAi文库 构建 油菜 双元载体
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 920-924
• 分类号: Q785
• 字数: 2303字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2010.05.005

摘要

为了通过构建高通量RNAi(RNA干扰)双元载体来得到油菜RNAi文库,对PCR引物设计时,在目的片段5'端和3'端分别引入合适的酶切位点序列,在3种中间载体的基础上构建高通量RNAi双元载体pHBMT4.该载体Bsu36Ⅰ酶切位点间的片段可被油菜的任意一种功能片段取代.载体pHBMT4含有用以检测载体功效的gus报告基因,原多克隆位点处被一个插入目标序列表达框取代,该框含有的反向重复nos终止序列可自然形成发夹环结构引发转录后水平的基因沉默(PTGS).通过抽提的油菜总DNA与载体pHBMT4相连转化获得了油菜RNAi文库,为以后研究油菜的基因组功能打下良好的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	单长民	滨州医学院遗传学教研室	39	252	7.0	15.0
2	马立新	湖北大学生命科学学院分子微生物学与基因工程实验室	77	616	14.0	21.0
3	武玉永	滨州医学院遗传学教研室	31	101	6.0	8.0
4	谭秀华	滨州医学院遗传学教研室	17	54	4.0	6.0