干种子高质量总RNA的快速提取方法

• 作者: 刘旭 卢新雄 张志娥 胡群文 辛霞 陈晓玲
• 来源期刊: 植物遗传资源学报
• 学科: 农学
• 关键词: 种子 总RNA提取 SDS 异硫氰酸胍 RNA反转录 RT-PCR
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 基因挖掘
• 页码范围: 360-363
• 分类号: S3
• 字数: 3435字
• 语种: 中文

摘要

高效快速提取高质量的种子RNA是种子分子生物学研究的基础.现有的提取方法难以高效快速地从种子中得到高质量的总RNA.本试验有机地将改进SDS法和异硫氰酸胍法相结合,采用改进的酸性SDS提取液、不溶性PVPP(聚乙烯聚吡咯烷酮)阻止酚类氧化、KAc去除多糖、异丙醇沉淀RNA,可以高效地从0.04～O.1g水稻、大豆、蚕豆、芸豆、花生等干种子中提取到高质量总RNA.此法提取的总RNA,能够满足分子生物学研究的要求,可以进行反转录和RT-PCR反应,用于基因表达研究,并为从具相似成分的其他物种干种子提取总RNA提供参考方法.