人IA-2基因的部分区段克隆表达及其在1型糖尿病诊断中的应用价值评估

• 作者: 冯晓燕 刘喜明 宋晓国 张贺秋 戴振华 方平 朱翠侠 楚晓燕 王国华 陈坤
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 1型糖尿病 蛋白酪氨酸磷酸酶 蛋白酪氨酸磷酸酶自身抗体 酶联免疫吸附测定法
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 12-16
• 页数: 5页
• 分类号: Q789|R392.1
• 字数: 4169字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2010.01.003

摘要

目的:构建人IA-2基因不同区段原核表达载体,诱导表达获得重组蛋白,并初步验证其在1型糖尿病蛋白酪氨酸磷酸酶自身抗体检测中的价值.方法:用RT-PCR方法调取目的基因,构建相应的原核表达质粒,转化大肠杆菌HB101,诱导表达获得纯化重组蛋白;以重组蛋白为包被抗原,初步建立检测蛋白酪氨酸磷酸酶自身抗体的ELISA方法,评价各片段在1型糖尿病诊断中的价值.结果:获得了2种可被1型糖尿病患者血清识别的重组人蛋白酪氨酸磷酸酶抗原区段IA-2(601～979)和IA-2(683～979),检测敏感性和特异性相当,但IA-2(683～979)检测的阳性D450mm值明显高于IA-2(601～979),成为首选的抗原区段.结论:所选重组人IA-2(683～979)抗原区段具有良好的抗原性,可作为1型糖尿病患者辅助诊断试剂的候选抗原.