家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂基因serpin16的表达规律及体外重组表达

• 作者: 夏庆友 张艳 李游山 王凌燕 董照明 赵萍
• 来源期刊: 蚕业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 家蚕 丝腺 丝氨酸蛋白酶抑制剂 半定量RT-PCR 原核表达
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 236-242
• 分类号: S881.2|Q78
• 字数: 5404字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0257-4799.2010.02.006

摘要

家蚕(Bombyx mori)的丝腺是丝蛋白合成分泌的场所,存在多种丝氨酸蛋白酶抑制剂.为探究家蚕丝蛋白的合成和保护机制,采用半定量RT-PCR的方法调查家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂基因serpin16在家蚕不同发育时期和5龄第5天幼虫各个组织器官中的表达特征,结果表明家蚕serpin16基因仅在4眠-5龄第6天的发育期表达,并且仅在丝腺中特异表达,其中在中部丝腺前区转录水平最高,而在中部丝腺中区和后区的转录水平较低;进一步构建pGEX-4T-1-serpin16原核表达载体,并转化至大肠杆菌(Eschevichia coli)BL21(DE3),经IPTG诱导获得融合蛋白, 纯化后得到单一的目的蛋白.家蚕serpin16基因在幼虫丝腺的特异表达模式提示其可能与家蚕的吐丝过程密切相关,推测该基因在维持丝腺稳定的泌丝环境中发挥重要作用.