重组人肝细胞生长因子激活因子质粒的构建、表达和功能研究

• 作者: 周学明 夏强 夏韵 张建军 张程 徐龙妹 薛峰 邓维
• 来源期刊: 胃肠病学
• 学科: 医学
• 关键词: 肝细胞生长因子 肝细胞生长因子激活因子 重组融合蛋白质类 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 8-11
• 页数: 4页
• 分类号: R5
• 字数: 3399字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-7125.2010.01.004

摘要

背景:肝细胞生长因子激活因子(HGFA)是活化单链前体HGF(pro-HGF)成为有生物学功能的HGF的关键酶,在受损组织器官的修复和再生中发挥重要作用.目的:制备rhHGFA-Fc融合蛋白并证实其具有肝细胞保护功能.方法:采用基因重组技术构建表达人源化HGFA成熟肽段与人IgG Fc段融合蛋白的载体.以脂质体介导法转染人胚肾293细胞.纯化293细胞表达产物,以蛋白质印迹法鉴定纯化蛋白(rhHGFA-Fc融合蛋白)及其对pro-HGF的酶切活性,以流式细胞术检测融合蛋白介导的肝细胞凋亡抑制作用.结果:SDS-PAGE显示转染重组质粒的293细胞总蛋白纯化产物在62 kDa处显示单一蛋白条带.蛋白质印迹法结果显示纯化的rhHGFA-Fc融合蛋白能与抗hHGFA单克隆抗体发生特异性反应,并将pro-HGF酶切为α链和β链,酶切活性呈剂量依赖性,半效酶切活性(IC50)为8.22 nmol/L;流式细胞术结果显示融合蛋白通过激活pro-HGF发挥其抑制肝细胞凋亡的作用.结论:293细胞表达的rhHGFA-Fc融合蛋白纯度高、酶切活性强,可高效激活pro-HGF,对于肝组织严重损伤,特别是肝硬化基础上肝损伤的治疗具有潜在价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张建军	上海交通大学医学院附属仁济医院器官移植科	75	353	10.0	15.0
2	薛峰	上海交通大学医学院附属仁济医院器官移植科	30	115	7.0	9.0
3	张程	上海交通大学医学院附属仁济医院器官移植科	3	6	1.0	2.0
4	夏韵	上海交通大学医学院附属仁济医院器官移植科	2	0	0.0	0.0
5	周学明	上海中医药大学实验动物中心	1	0	0.0	0.0
6	徐龙妹	上海交通大学医学院附属仁济医院器官移植科	1	0	0.0	0.0
7	邓维	上海交通大学医学院附属仁济医院器官移植科	3	40	1.0	3.0