SA/TNFα双功能融合蛋白的克隆、表达及活性研究

• 作者: 徐翠香 李金龙 胡志明 高基民
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 医学
• 关键词: 人肿瘤坏死因子α 链亲和素 融合蛋白 纯化
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 页码范围: 36-39
• 分类号: R392.5
• 字数: 3404字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2010.03.036

摘要

目的:制备链亲合素标记的TNFα双功能蛋白,并对其活性进行研究.方法:构建原核表达质粒pET24a-SATNFα和pET21a-TNFα-SA;转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,Ni-NTA亲合层析纯化后进行透析复性;流式细胞仪检测融合蛋白对生物素化MB49细胞的锚定活性,L929细胞杀伤实验检测融合蛋白的TNFα活性.结果:成功制备了两种链亲合素标记的TNFα双功能融合蛋白SA-TNFα和TNFα-SA;其表达量分别约占总蛋白的30%和23%,纯化效率均达90%以上;两种融合蛋白均能有效地锚定于生物素化的MB49细胞表面,其锚定效率分别为95%和92%;L929细胞杀伤实验示SATNFα具备TNFα活性,但TNFα-SA不具备TNFα活性.结论:成功制备了双功能笥的链亲合素标记的TNFα融合蛋白,TNFα在该融合蛋白中的位置与其活性有重要的关系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李金龙	南方医科大学生物技术学院生物治疗研究所	23	72	4.0	7.0
2	胡志明	南方医科大学生物技术学院生物治疗研究所	25	210	8.0	13.0
3	徐翠香	南方医科大学生物技术学院生物治疗研究所	4	18	2.0	4.0
4	高基民	南方医科大学生物技术学院生物治疗研究所	16	101	6.0	9.0