摘要:
目的:以基于核磁共振(nuclear magnetic resonance, NMR)的代谢组学方法对Wilson病(Wilson's disease, WD)模型大鼠及中药干预后的WD模型大鼠血清进行代谢组学研究,分析中药干预后大鼠血清中小分子代谢物的变化,从小分子代谢物层面上探讨中药治疗Wilson 病的内在机制.方法:33只雄性Wistar大鼠,体重180±20g,随机被分为健康对照组(n=11),WD模型组(n=11)和中药干预组(n=11).健康对照组自由摄水饮食,WD模型组和中药干预组采用铜负荷法制作Wilson病大鼠模型,以肝豆灵治疗中药干预组大鼠.采用NMR技术对大鼠血清进行检测,以MestRe-C 2.3软件及自编软件对谱图进行手动调相、基线校正和谱峰对齐.对样品进行分段积分,将积分数据归一化后构成数据矩阵, 并利用PCA(Principle Component Analysis)方法对数据矩阵进行统计分析.将健康对照组和WD模型组相对比,WD模型组和中药给药组相对比,以分析中药给药之后大鼠血清内小分子代谢物的变化.结果:相对于健康对照组,WD模型组大鼠血清甜菜碱(betaine),氧化三甲胺(TAMO)、低密度脂蛋白(LDL)、极低密度脂蛋白(VLDL)、葡萄糖(glucose)含量有显著降低,胆碱(choline)、胆碱磷酸(phosphorylcholine)有所降低,乳酸(lactate)、谷氨酰胺(glutamine)、糖蛋白(glycoprotein)有显著升高,肌酸酐(creatinine),精氨酸(arginine)有所升高.相对于WD模型组,中药干预组大鼠血清糖蛋白(glycoprotein)、3-羟基丁酸(3-hydroxybutyrate)、脂质(Lipid,mainly VLDL/LDL)、葡萄糖(glucose)、胆碱(choline)、磷酸胆碱(phosphorylcholine)有显著升高,亮氨酸(leucine)、异亮氨酸(isoleucine)有所升高,乳酸(lactate)显著下降,谷氨酰胺(glutamine)、肌氨酸+肌氨酸酐(Creatine+ creatinine)、精氨酸(arginine)有所下降.结论:这些发生改变的代谢物可以作为中药干预WD的小分子代谢标志物参考,为进一步研究中药治疗WD的内在代谢机制提供思路.