RNA干扰技术抑制新加坡石斑鱼虹彩病毒感染细胞多肽ICP46与绿色荧光蛋白融合基因的表达

• 作者: 夏立群 张红莲 梁海鹰 秦启伟
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: RNA干扰 绿色荧光蛋白 石斑鱼虹彩病毒 感染细胞多肽ICP46
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 611-617
• 分类号: Q78|S941
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1231.2010.06703

摘要

新加坡石斑鱼虹彩病毒(singapore grouper iridovirus,SGIV)是一种严重的能引起全身性疾病的病原体,对石斑鱼养殖造成了重大的经济损失.将含有SGIV感染细胞多肽ICP46(infected cell polypeptides 46)基因的真核表达载体pEGFP-ICP46转染到胖头鲤细胞(fathead minnow cells,FHM)中进行融合表达,用荧光显微镜观察到ICP46-GFP融合蛋白主要分布于FHM细胞的细胞质中.根据SGIV ICP46的序列,设计并体外化学合成了特异性干扰SGIV ICP46的siRNA(siRNA-ICP46),与pEGFP-ICP46共转染到FHM细胞中,通过荧光显微镜观察不同时间点荧光强度的变化.转染后24～48 h,实验细胞(共转染siRNA-ICP46和pEGFP-ICP46)和阳性对照细胞(共转染siRNA-GFP和pEGFP-ICP46)中的荧光微弱,发荧光的细胞数量较阴性对照(共转染siRNA-Negative和pEGFP-ICP46)少70%左右,但其后实验细胞和阳性对照细胞的荧光强度开始增强,在转染后72 h其与阴性对照组已差别不大.说明体外化学合成的siRNA-ICP46转染后24～48 h可有效抑制FHM细胞中外源导入SGIV ICP46基因的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁海鹰	广东海洋大学水产学院	25	82	5.0	8.0
2	张红莲	广东海洋大学水产学院	13	24	3.0	4.0
4	夏立群	广东海洋大学水产学院	23	58	4.0	6.0
8	秦启伟	中国科学院南海海洋研究所中国科学院海洋生物资源可持续利用重点实验室	6	113	3.0	6.0