传染性胰腺坏死病毒VP3蛋白的原核表达及抗原性分析

• 作者: 乔薪瑗 刘巍巍 刘敏 哈卓 李一经 葛俊伟 赵丽丽 赵永欣
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 传染性胰腺坏死病毒 VP3基因 原核表达 抗血清
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 604-610
• 分类号: S917
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1231.2010.06690

摘要

应用RT-PCR方法扩增了IPNV编码内衣壳VP3蛋白的基因615 bp,将VP3基因克隆至原核表达载体pET30b,并在大肠杆菌BL21中得到了表达.通过SDS-PAGE分析表明,重组菌诱导后得到了预期大小约30ku的VP3蛋白,与理论值相符,经薄层扫描分析表明目的蛋白表达量可占菌体总蛋白的30%.用镍离子亲和层析柱纯化可溶性的VP3蛋白,并制备抗血清.Western-blotting结果显示,VP3蛋白可被兔抗IPNV阳性血清识别;间接ELISA结果显示,IPNV细胞培养物作为抗原,兔抗VP3蛋白高免血清稀释度为1:25 600时,P/N>2,抗血清可与IPNV全病毒发生反应,以上两项结果说明,表达的VP3蛋白与天然的IPNV VP3蛋白一样具有相同的抗原性.试验利用原核表达系统成功地高效表达了IPNV VP3蛋白,融合蛋白以可溶性形式存在,并制备了高效价的抗血清.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	葛俊伟	东北农业大学动物医学学院	74	425	11.0	17.0
2	刘敏	东北农业大学动物医学学院	57	476	12.0	20.0
3	乔薪瑗	东北农业大学动物医学学院	54	297	9.0	14.0
4	赵丽丽	东北农业大学动物医学学院	18	191	7.0	13.0
5	刘巍巍	东北农业大学动物医学学院	7	25	3.0	5.0
6	赵永欣	东北农业大学动物医学学院	6	23	3.0	4.0
7	哈卓	东北农业大学动物医学学院	2	16	2.0	2.0