白斑综合征病毒环介导等温扩增快速检测方法的建立

• 作者: 何琳 徐海圣 戎华南 王美珍
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 对虾 白斑综合征病毒 环介导等温扩增 快速检测
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 598-603
• 分类号: S945.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1231.2010.06741

摘要

根据对虾白斑综合征病毒(WSSV)囊膜蛋白VP28基因保守序列,利用Primer Explorerv4.0软件设计了4条引物,建立了白斑综合征病毒环介导等温扩增快速检测方法,对反应温度和反应时间等参数进行了优化,同时将建立的LAMP检测方法与巢式PCR进行了比较分析.结果表明,LAMP最适反应在64℃恒温条件60 min内完成,凝胶电泳呈现梯型条带;反应体系中添加SYBR Green I荧光染料后,绿色的阳性结果明显区别于橙色阴性结果.LAMP方法的最低检出限为100拷贝/μL,灵敏度较巢式PCR高100倍,而且LAMP方法在1 h内即可完成检测,操作简单,无需复杂仪器,肉眼可直接观察检测结果.用建立的LAMP方法对临床发病南美白对虾样品进行了检测,结果表明,LAMP方法适合对虾白斑综合征病毒的现场快速检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何琳	浙江大学动物科学学院	11	150	5.0	11.0
2	徐海圣	浙江大学动物科学学院	45	734	15.0	26.0