RNAi阻断乙酰肝素酶介导的卵巢上皮癌细胞系浸润转移体外实验研究

• 作者: 张玮 李力 王琪 陈泓
• 来源期刊: 现代妇产科进展
• 学科: 医学
• 关键词: 卵巢肿瘤 细胞系 肿瘤侵润 乙酰肝素酶 RNAi shRNA表达载体 细胞功能
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 419-422,426
• 分类号: R737.31
• 语种: 中文

摘要

目的:探讨乙酰肝素酶shRNA抑制人卵巢癌细胞系乙酰肝素酶(HPSE)表达及对其侵润侵袭能力的影响.方法:针对HPSE mRNA的不同区域设计并构建不同的shRNA表达载体,脂质体法转染HPSE高表达的人卵巢癌细胞系SKOV3,实时定量PCR检验干扰效率,选择抑制率最高的一组细胞进行抗性筛选,获得稳定转染细胞株,分别用RT-PCR和Western blot检验HPSE mRNA和蛋白表达受抑制情况,分别采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和集落形成实验测定细胞增殖能力,分别采用MatrigelInvasion,Transwell Migration和Adhesion Assay方法测定细胞体外侵袭、迁移和黏附能力.结果:用荧光定量PCR对不同shRNA干扰载体的干扰效果进行检测,结果显示,pGPU6/GFP/Neo-HPSE1222组相对拷贝数为0.936±0.417,与其他3组相比,差异有统计学意义,抑制率为48.63%.获得的该组稳定干扰表达SKOV3细胞系,经RT-PCR和Western blot检验其HPSE表达明显减少.细胞生长曲线显示干扰组细胞倍增时间延长.干扰组与对照组集落形成率分别为0.0433±0.0451和0.0397±0.00687,差异无统计学意义(P＞0.05).迁移能力实验中,干扰组与对照组相比,差异无统计学意义(P＞0.05).干扰组细胞黏附能力高于对照组(P＜0.05).侵袭能力实验干扰组低于对照组(P＜0.05).结论:采用构建shRNA干扰载体对HPSE基因进行干扰,有效地抑制了HPSE基因的活性,降低了卵巢癌细胞侵袭能力,黏附能力增强.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李力	广西医科大学肿瘤医院妇瘤科	377	1810	20.0	26.0
2	张玮	广西医科大学肿瘤医院妇瘤科	149	564	13.0	17.0
3	王琪	广西医科大学肿瘤医院妇瘤科	87	263	8.0	11.0
4	陈泓	广西医科大学肿瘤医院妇瘤科	11	19	2.0	4.0