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非糖基化促红细胞生成素的聚乙二醇定点修饰及修饰产物性质
非糖基化促红细胞生成素的聚乙二醇定点修饰及修饰产物性质
作者:
刘永东
康爱君
李秀男
汪音爵
石红
苏志国
郝素娟
马光辉
马润宇
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
促红细胞生成素
非糖基化
聚乙二醇修饰
单甲氧基聚乙二醇-丙醛
摘要:
临床用重组人促红细胞生成素(rhEpo)是中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cell, CHO)表达的糖蛋白, 糖基对稳定蛋白的结构和生物活性非常重要, 但CHO表达体系生产成本高、产量低. 以大肠杆菌表达的促红细胞生成素为非糖基化蛋白(rh-ngEpo), 对其进行聚乙二醇(PEG)修饰可以提高蛋白稳定性和体内循环半衰期. 本文采用分子量为20000的N-末端专一性的单甲氧基聚乙二醇-丙醛(mPEG-ALD)修饰rh-ngEpo, 对影响修饰反应的因素进行了考察. 结果表明, 在最佳反应条件下, 单修饰率可达55%. 修饰混合物经离子交换层析分离, 获得了纯度大于95%的单修饰产物, 其二、三级结构证明与原蛋白相似. 肽图分析结果表明, PEG绝大部分修饰在蛋白N-末端的氨基酸残基上. ELISA分析表明, 单修饰产物的体外活性虽然比修饰前减少30%, 但热稳定性得到显著增强, 在SD大鼠体内的药代动力学性质得到显著提高. 研究结果表明, PEG可以在一定程度上替代糖基的作用, PEG修饰的非糖基化Epo有望成为一种新型的促红细胞生成蛋白药物.
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文献信息
篇名
非糖基化促红细胞生成素的聚乙二醇定点修饰及修饰产物性质
来源期刊
高等学校化学学报
学科
化学
关键词
促红细胞生成素
非糖基化
聚乙二醇修饰
单甲氧基聚乙二醇-丙醛
年,卷(期)
2010,(11)
所属期刊栏目
研究方向
页码范围
2239-2245
页数
分类号
O629.73
字数
4828字
语种
中文
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非糖基化
聚乙二醇修饰
单甲氧基聚乙二醇-丙醛
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
高等学校化学学报
主办单位:
中华人民共和国教育部委托
吉林大学和南开大学
出版周期:
月刊
ISSN:
0251-0790
CN:
22-1131/O6
开本:
大16开
出版地:
长春市吉林大学南湖校区
邮发代号:
12-40
创刊时间:
1980
语种:
chi
出版文献量(篇)
11695
总下载数(次)
9
总被引数(次)
133912
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:
the National Natural Science Foundation of China
官方网址:
http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:
青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:
数理科学
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