bcr-abl基因真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的表达

• 作者: 周永安 王艳芳 苏丽萍
• 来源期刊: 白血病·淋巴瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 慢性粒细胞白血病 bcr-abl P210蛋白 基因克隆 基因表达
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 页码范围: 596-599
• 分类号: R73
• 字数: 3176字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9921.2010.10.007

摘要

目的 构建慢性粒细胞白血病bcr-abl融合基因的真核表达载体,并在哺乳动物细胞COS-7中高效表达.方法 提取慢性粒细胞白血病K562细胞的RNA,经RT-PCR技术扩增得到bcr-abl基因后,将其克隆入真核表达载体pEGFP-N3中,并进行PCR和酶切鉴定.鉴定为阳性的克隆,再进一步进行测序分析.将构建成功的真核表达载体转入COS-7细胞中进行瞬时表达.结果 反转录PCR扩增后的产物,经琼脂糖凝胶电泳可以在约874 bp处看见一特异性的条带,序列分析证明扩增产物与GeneBank中的bcr-abl基因序列相同.将pEGFP-bcr-abl真核表达载体转入COS-7细胞后,经RT-PCR、Western blotting检测证明表达产物正确.结论 成功构建了含有bcr-abl融合基因的真核表达质粒,从而为进一步研究其结构和功能,寻找CML诊疗的新方法奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周永安	山西省儿童医院中心实验室	16	12	2.0	2.0
2	苏丽萍	山西省肿瘤医院血液科	69	161	7.0	9.0
3	王艳芳	北京大学第三医院血液科	30	126	6.0	10.0