抑制卵巢癌A2780/Taxol细胞has-miR-27a表达对紫杉醇敏感性影响的研究

• 作者: 于利利 吴莉英 李智敏 王泽华 王静 胡沙 蔡晶
• 来源期刊: 现代妇产科进展
• 学科: 医学
• 关键词: 卵巢肿瘤 细胞株 miR-27a P-糖蛋白 药物耐受 多药耐药相关蛋白 紫杉醇
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 282-285
• 分类号: R737.31
• 语种: 中文

摘要

目的:研究抑制卵巢癌A2780/Taxol细胞hsa-miR-27a表达对紫杉醇敏感性的影响.方法:用浓度递增法建立卵巢癌耐紫杉醇细胞系A2780/Taxol;Stem-loop realtime PCR技术检测A2780/Taxol及亲本细胞A2780中hsa-miR-27a表达水平;利用脂质体Lipofectamine 2000将化学合成的miR-27a抑制物及阴性对照(Negative Control,NC)转染A2780/Taxol细胞;分别用Real-time PCR和蛋白印迹法技术检测MDRl mRNA和P-glyco-protein(P-gp)蛋白表达;MTT检测A2780/Taxol对紫杉醇敏感性的变化;流式细胞术检测细胞内P-gp荧光底物罗丹明123(Rh-123)的荧光强度.结果:(1)成功建立了卵巢癌耐紫杉醇细胞系A2780/Taxol;(2)miR-27a在A2780/Taxol细胞中高表达,与A2780细胞相比,表达增高2.2倍.(3)P-gp蛋白在A2780/Taxol细胞中高表达,在A2780细胞中未检测出其表达;(4)转染miR-27a抑制物后,A2780/Taxol细胞的MDRl mRNA和P-gp表达下降,与转染NC组相比,P-gp表达降低36%;对紫杉醇的敏感性增加,IC50为0.53μmoL/L,与转染NC组IC50 6.8μmol/L相比,有明显差异;(5)流式细胞仪结果显示,细胞内Rh-123荧光强度在转染抑制物的A2780/Taxol细胞为5.10±0.35,与A2780/Taxol细胞的2.95±0.39和转染NC的A2780/Taxol细胞的3.30±O.45相比,差异均有统计学意义.结论:hsa-miR-27a在卵巢癌耐紫杉醇A2780/Taxol细胞中高表达,可能通过间接调节P-gp的表达和功能,参与耐药.抑制miR-27a表达后,可以增加A2780/Taxol细胞对紫杉醇的敏感性,部分逆转耐药.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王泽华	华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科	260	1294	18.0	23.0
2	王静	华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科	196	1363	19.0	30.0
3	李智敏	华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科	12	48	4.0	6.0
4	蔡晶	华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科	23	40	3.0	6.0
5	胡沙	华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科	25	142	8.0	10.0
6	于利利	华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科	28	158	8.0	11.0
7	吴莉英	华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科	5	11	2.0	3.0