人催乳素受体胞外区蛋白的原核表达及纯化

• 作者: 冯振卿 刘雪瑶 姚俊 屈芫 曹新 魏钦俊 鲁雅洁
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 人催乳素受体 融合蛋白 原核表达 纯化
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 7-11
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3624字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2010.01.002

摘要

目的:建立人催乳素受体的原核表达系统,并在大肠杆菌中获得表达.方法:由RT-PCR获得人催乳素受体(human prolactin receptor,hPRLR)胞外区氨基酸的编码序列,扩增并通过酶切位点修饰后克隆至pMD18-T载体,经测序正确后,切下编码序列连接到重组表达载体pGEX-4T-2中,转化大肠杆菌Rosetta(DE3),用IPTG诱导重组工程菌表达,使用谷胱甘肽偶联的GSTrapFF柱亲和层析纯化重组蛋白.结果:重组菌株可以表达GST-hPRLR融合蛋白,用免疫印迹反应鉴定纯化的融合蛋白,在相对分子质量为37.6×103处有一条带.结论:利用大肠杆菌表达系统获得了较高纯度的GST-hPRLR融合蛋白,为进一步研究催乳素受体的功能和制备特异性的抗体奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	鲁雅洁	南京医科大学基础医学院	24	70	4.0	7.0
2	魏钦俊	南京医科大学基础医学院	44	194	8.0	11.0
3	姚俊	南京医科大学基础医学院	42	154	7.0	11.0
4	刘雪瑶	南京医科大学基础医学院	1	0	0.0	0.0
5	屈芫	南京医科大学基础医学院	1	0	0.0	0.0
6	曹新	南京医科大学基础医学院	61	324	10.0	15.0