百脉根原生质体的分离和酶解条件的研究

• 作者: 师尚礼 李玉珠 王娟 赵小强 陶茸 马晖玲
• 来源期刊: 草地学报
• 学科: 农学
• 关键词: 百脉根 子叶 愈伤组织 酶解条件 原生质体
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 798-804
• 分类号: S541.6|Q943.1
• 字数: 7014字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11733/j.issn.1007-0435.2010.06.009

摘要

分别以百脉根里奥(Lotus corniculatus L. cv. Leon)无菌苗子叶及由下胚轴和子叶形成的胚性愈伤组织为供体材料,进行原生质体游离,研究不同酶解条件对原生质体分离的影响,以期为进一步开展属间体细胞杂交及培育新品种奠定研究基础.结果表明:子叶和愈伤组织原生质体分离最适的酶液组合均为2%纤维素酶+0.5%果胶酶+0.3%半纤维素酶、以及0.55 mol·L-1甘露醇,产量及活力分别可达4.13×106 个·g-1,65%和3.8×106个·g-1,67.4%;最佳酶解时间分别为6 h和12 h.预培养8～10 d,CPW-10溶液中预质壁分离1 h或预暗培养1 d等预处理措施可显著提高愈伤组织原生质体的产量及活力(P＜0.01).