乙型肝炎病毒聚合酶片段的表达及其在血清学检测中的应用

• 作者: 周育森 姚鹏 安小平 张宝中 张昕 童贻刚 范公忍 陈士华
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝炎 乙型 慢性 血清学试验 基因 pol 酶联免疫吸附测定
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 163-165
• 页数: 3页
• 分类号: R512.62
• 语种: 中文

摘要

目的 建立乙型肝炎患者血清HBV病毒聚合酶抗体(抗-HBp)的ELISA检测方法.方法 构建HBV反转录酶/DNA聚合酶(HBV-Pol)基因原核表达载体pQE30-Pol,表达并纯化目的蛋白,用间接ELISA法检测274例乙型肝炎患者及50例正常人血清中的抗-HBp抗体,并与HBV-DNA实时荧光定量检测结果比较.结果 成功将HBV-Pol基因插人原核表达载体pQE30,并在大肠埃希菌M15中获得了高效表达,表达产物以包涵体形式存在.以纯化的重组蛋白建立间接ELISA检测方法,在检测的274例乙型肝炎患者中,HBsAg~+/HBeAg~+/抗HBc~+,HBsAg~+/抗HBe~+/抗HBc~+,HBsAg~+/抗HBc~+患者血清中的抗-HBp抗体阳性率分别为97.8%、57.9%和13.2%,平均阳性率58.8%,而正常人血清抗-HBp均为阴性.运用此法测得的血清抗-HBp阳性率和实时定量PCR检测结果无统计学差异(P=0.359).结论 成功表达了HBV-Pol片段并且建立了血清抗-HBp抗体的检测方法,为进一步研究乙型肝炎患者血清HBV-Pol抗体的血清学意义奠定了基础.