海南龙血树DNA提取与ISSR反应体系的优化

• 作者: 唐燕琼 尹俊梅 莫饶 董美超
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 农学
• 关键词: 海南龙血树 DNA提取 ISSR-PCR反应体系 优化
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 37-40
• 分类号: S722.1.4
• 字数: 4432字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2010.05.157

摘要

目的:从海南龙血树叶片巾提取出高质量的总DNA,建立与优化海南龙血树ISSR的反应体系.方法:采用4种DNA提取方法,提取海南龙血树叶片中的总DNA,并对DNA进行紫外和电泳检测.采用改良CTAB法提取了基因组DNA模板,对海南龙血树ISSR-PCR反应体系中各个主要影响因子进行了优化和筛选.结果:改良CTAB法提取的DNA A260/A260在1.7～1.9之间,纯度高、杂质少、DNA完整性好.根据PCR产物的琼脂精凝胶检测结果,由试验得到的最佳反应体系为:60ng模板DNA,1.5mmol/L Mg2+,0.25mmol/L dNTPs,1.0μmol/L引物,1U Taq酶,总体积为20μl.结论:改良CTAB法可以从海南龙血树叶片中提取高质最DNA,该反应体系适用于应用ISSR标记开展海南龙血树DNA指纹、遗传多样性等研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	尹俊梅	中国热带农业科学研究院热带作物品种资源研究所	78	444	12.0	17.0
2	莫饶	海南大学农学院	24	144	7.0	10.0
3	唐燕琼	海南大学农学院	36	245	9.0	14.0
4	董美超	海南大学农学院	4	13	2.0	3.0