精子介导法生产转基因牦牛杂种胚胎的研究

• 作者: 字向东 梁冠男 陈绍威
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 农学
• 关键词: 牦牛 精子介导基因转移 胚胎体外生产 绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2010,（8）
• 页码范围: 168-173
• 分类号: S8
• 字数: 4527字
• 语种: 中文

摘要

研究外源DNA转染对牦牛精子体外受精(IVF)、早期胚胎发育以及绿色荧光蛋白(GFP)基因在早期胚胎表达的影响.用构建融合人乳铁蛋白基因绿色荧光蛋白表达载体(pAcGFP1-hLF)转染的牦牛精子IVF黄牛卵母细胞,生产的胚胎在荧光显微镜下观察GFP表达情况.结果显示,用环形质粒、线性质粒pAcGFP1-hLF转染的精子及未转染精子IVF后的卵裂率分别为56.4%、54.8%和61.0%,线性转染的囊胚率显著低于环形转染(17.7%与 35.7%).环形质粒转染的精子用DNaseⅠ消化、不消化及未转染的精子IVF后卵裂率分别为44.8%、55.2%和56.3%,囊胚率分别为33.3%、33.3%和30.2%.未经DNaseⅠ消化洗涤的环形质粒组GFP胚胎阳性率显著高于线性质粒组(99.3%与 76.6%); DNaseⅠ消化组GFP胚胎阳性率极显著低于不消化组(25.4%与99.3%).结果表明,用环形质粒DNA转染牦牛精子不会影响其受精及早期胚胎发育能力,但DNaseⅠ消化洗涤显著降低GFP胚胎阳性率.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	字向东	西南民族大学动物遗传育种学教育部重点实验室	81	350	9.0	15.0
2	陈绍威	西南民族大学动物遗传育种学教育部重点实验室	5	17	3.0	4.0
3	梁冠男	西南民族大学动物遗传育种学教育部重点实验室	3	7	1.0	2.0