利用靶定基质蛋白基因m的小干扰RNA抑制2009甲型H1N1流感病毒的复制

• 作者: 侯继业 周晓巍 杨志新 黄培堂
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 甲型H1N1流感病毒 基质蛋白基因 小干扰RNA 病毒复制
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 646-649
• 分类号: Q78
• 字数: 3040字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2010.05.011

摘要

目的:设计、构建并筛选针对流感病毒基质蛋白基因m的小干扰RNA(siRNA),检测其对2009甲型H1N1流感病毒复制的抑制效果.方法:设计3条针对流感病毒m基因的siRNA,并克隆到短发夹型(shRNA)siRNA表达载体pSilencer2.1-U6-hygro上;经测序证明构建成功后,将表达3种siRNA的质粒和阴性对照质粒psiRNA-control分别转染MDCK细胞,用湖霉素筛选稳定表达细胞株,用H1N1流感病毒感染细胞,通过Real-time PCR和Western印迹检测干扰效果.结果:构建了3个针对流感病毒m基因的siRNA表达质粒,3种siRNA均使m基因的mRNA水平降低,其中M1-306的抑制效率达60%;3种siRNA均使流感病毒NA蛋白的表达量降低,M2-25、M1-105的抑制效率明显,M1-306略低.结论:针对m基因的siRNA可以有效抑制流感病毒在MDCK细胞中的复制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄培堂	军事医学科学院生物工程研究所	190	1493	20.0	30.0
2	周晓巍	军事医学科学院生物工程研究所	43	220	8.0	13.0
3	杨志新	军事医学科学院生物工程研究所	8	33	3.0	5.0
4	侯继业	军事医学科学院生物工程研究所	1	1	1.0	1.0