重组AAV2-NTF2对人视网膜微血管内皮细胞中血管内皮生长因子表达的影响

• 作者: 史煜 唐仕波 曹亮 谢琳 陈凌燕 陈春生
• 来源期刊: 眼科研究
• 学科: 医学
• 关键词: 核运输因子2 人视网膜微血管内皮细胞 血管内皮生长因子
• 年，卷（期）: 2010,（7）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 577-581
• 分类号: R774.1
• 字数: 3963字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-0808.2010.07.001

摘要

目的 观察核运输因子2(NTF2)在体外培养的人视网膜微血管内皮细胞(RCECs)中的表达,并探讨其高表达对RCECs中血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法 取中山眼科中心眼库的人眼球,分离视网膜组织用以培养人RCECs,并用Ⅷ因子抗体免疫组织化学法鉴定.免疫组织化学法观察细胞中NTF2的表达.通过重组腺相关病毒(rAAV2)将外源性NTF2导入培养的RCECs内,rAAV2-NTF2和rAAV2-EGFP转染RCECs,未转染组为对照组.激光共焦显微镜下观察增强型绿色荧光蛋白(EGFP)阳性细胞,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组NTF2、VEGF mRNA的表达变化,并进行定量分析.结果 培养的RCECs呈典型铺路石样排列,荧光显微镜下可见Ⅷ因子阳性表达为绿色荧光,95%以上的活体细胞可摄取DiI标记的Ac-LDL,并在荧光显微镜下呈现红色荧光.RCECs可表达NTF2,主要位于细胞质内,富集于核周.rAAV2-EGFP转染后,激光共焦显微镜观察可见大量EGFP阳性细胞,实验组NTF2在mRNA水平表达明显强于GFP组和对照组(t=15.06,t=7.02,P＜0.01),VEGF表达明显下降(t=7.40,t=14.08,P＜0.01).结论 rAAV2-NTF2转染视网膜内皮细胞后,NTF2可稳定高表达,VEGF表达下降,NTF2可能通过调节VEGF的表达参与新生血管的发生.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐仕波	中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室	91	528	11.0	17.0
2	史煜	南京医科大学附属南京第一医院眼科	4	8	2.0	2.0
3	陈凌燕	中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室	12	56	4.0	7.0
4	谢琳	中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室	28	202	7.0	14.0
5	陈春生	南京医科大学附属南京第一医院眼科	6	13	2.0	3.0
6	曹亮	中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室	2	4	1.0	2.0