沙丁胺醇单克隆抗体的制备及间接ELISA方法的建立

• 作者: 孙远明 庞杰 彭述辉 徐振林 王保玲 袁利鹏 雷红涛
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 生物学
• 关键词: 沙丁胺醇 单克隆抗体 间接ELISA
• 年，卷（期）: 2010,（7）
• 页码范围: 171-175
• 分类号: Q785
• 语种: 中文

摘要

制备抗沙丁胺醇单克隆抗体,鉴定其特异性并建立间接竞争ELISA检测方法.以合成的沙丁胺醇完全抗原免疫Balb/c小鼠,利用杂交瘤技术进行细胞融合,筛选克隆得到稳定分泌抗沙丁胺醇抗体的单克隆杂交瘤细胞,命名为4E4和3A2.经鉴定,两个抗体亚类都为IgG,,其腹水纯化后效价分别达到2.56 ×105和1.28 ×105.以效价高且特异性较好的4E4细胞株获得的抗体建立间接竞争ELISA方法,经条件优化后得到标准曲线,检测范围为4.76～84.99ng/mL,IC50为20.12ng/mL,检测限为3.25ng/mL,与克伦特罗交叉反应率为253.62%,与其它结构类似物没有明显交叉反应.本研究制备的单克隆抗体和建立的间接ELISA方法,可用于开发同时检测沙丁胺醇和克伦特罗的试剂盒.