1.3倍乙型肝炎病毒全基因真核表达载体的构建及其在Bewo细胞中的表达

• 作者: 熊石龙 王前 蔡贞 资捷 郑磊
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒 1.3倍HBV基因组 真核表达载体 Bewo细胞
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 硕博专栏论著
• 页码范围: 126-129
• 页数: 4页
• 分类号: R512.62
• 语种: 中文

摘要

目的 构建1.3倍乙型肝炎病毒(HBV)全基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBV1.3,并观察其在Bewo细胞中的表达.方法 以质粒pMD18T-HBV上的HBV DNA序列为模板,构建1.3倍HBV全基因序列,将其插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),用酶切、PCR及测序鉴定,并把该载体转染Bewo细胞,以Western免疫印迹、微粒子酶免疫分析法(MEIA)和荧光定量PCR法分别检测胞内和上清中HBsAg、HBeAg蛋白的表达及HBV DNA水平.结果 通过酶切、PCR及测序鉴定,成功构建1.3倍HBV全基因表达载体,该载体可以在Bewo细胞系中表达和分泌HBsAg与HBeAg,并可检测到高水平的HBV DNA.结论 成功构建了1.3倍HBV全基因真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBV1.3,为研究胞内HBV宫内感染奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王前	南方医科大学南方医院检验医学中心	261	1480	18.0	23.0
2	熊石龙	南方医科大学南方医院检验医学中心	42	209	9.0	12.0
3	郑磊	南方医科大学南方医院检验医学中心	192	1001	14.0	18.0
4	蔡贞	南方医科大学南方医院检验医学中心	33	155	8.0	9.0
5	资捷	南方医科大学南方医院检验医学中心	3	8	2.0	2.0