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摘要:
目的:构建以木糖异构酶基因xylA为筛选标记的无抗生素标记Gateway系统植物表达载体.方法:克隆大肠杆菌木糖异构酶基因xylA并用其替换植物表达载体pCAMBIA1301中的hpt基因,利用载体中的多克隆位点将Gateway Binary Vector(pH7WG2D)中酶切位点Xba Ⅰ和Hind Ⅲ之间包括P35S、T35S、attR1、attR2和CmR-ccdB的片段重组入表达载体pCAMBIA1301中,构建表达载体pCAMBIA1301-xylA-GW,利用含有津田芜菁HY5基因片段的BP反应产物与载体进行LR反应,获得含有目的基因的植物表达载体pCAMBIA1301-xylA-HY5,并导入根癌农杆菌LBA4404中.结果:抗生素筛选及酶切和PCR鉴定表明成功构建了以xylA为筛选标记的无抗生素标记植物表达载体pCAMBIA1301-xylA-HY5.结论:利用木糖异构酶基因xylA结合Gateway克隆技术构建无抗生素标记植物表达载体,可简化、方便植物转基因表达载体构建.
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文献信息
篇名 以木糖异构酶基因xylA为选择标记的Gateway系统植物表达载体的构建
来源期刊 生物技术通讯 学科 生物学
关键词 Gateway技术 木糖异构酶基因 LR反应 植物表达载体
年,卷(期) 2010,(1) 所属期刊栏目 研究报告
研究方向 页码范围 35-38
页数 4页 分类号 Q78
字数 2548字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1009-0002.2010.01.008
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 李玉花 东北林业大学生命科学学院发育生物学研究室 168 1627 23.0 33.0
2 赵霞 东北林业大学生命科学学院发育生物学研究室 5 103 3.0 5.0
3 周波 东北林业大学生命科学学院发育生物学研究室 33 245 8.0 15.0
4 阎淑滑 东北林业大学生命科学学院发育生物学研究室 3 16 2.0 3.0
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研究主题发展历程
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Gateway技术
木糖异构酶基因
LR反应
植物表达载体
研究起点
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相关学者/机构
期刊影响力
生物技术通讯
双月刊
1009-0002
11-4226/Q
16开
北京丰台东大街20号
82-196
1989
chi
出版文献量(篇)
4313
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