用高效液相色谱测定重组人尿激酶原制剂的蛋白含量

• 作者: 将琴 张正光 李世崇 李小强 杨旭 胡显文 胥照平 袁婀娜 陶铜静 高丽华
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 注射用重组人尿激酶原 蛋白含量 高效液相色谱 方法学验证
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 80-82
• 页数: 3页
• 分类号: Q502
• 字数: 2178字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2010.01.020

摘要

目的:用RP-HPLC方法对注射用重组人尿激酶原制剂蛋白含量进行定量分析.方法:用反相C18柱、0.1%TFA水溶液与0.1%乙腈进行梯度洗脱,280 nm波长紫外检测器监测;以重组人尿激酶原同质标准品作为对照品,根据进样量和相应的峰面积建立标准曲线方程,将待测定样品的峰面积代入标准曲线方程,可测得蛋白含量.结果:按照方法学验证要求对此方法进行了专属性、检测限、定量限、线形、精密度(重复性、中间精密度)、准确度(回收率)考察,线性范围为9～27 μg,回收率在97%以上,RSD<2.0%,完全满足对制剂蛋白的定量需求.结论:本方法准确,适用于注射用重组人尿激酶原成品制剂蛋白定量测定.