一种获得高纯度睾丸支持细胞的分离方法

• 作者: 曲楠 李学超 王亚林 赵立 陈立军 麦海星 黄晨
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 分离 原代培养 FasL 睾丸支持细胞 器官移植基础实验
• 年，卷（期）: 2010,（31）
• 页码范围: 5797-5800
• 分类号: R318
• 字数: 5542字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.31.024

摘要

背景:研究证实睾丸支持细胞具有免疫抑制功能,可以被用于在睾丸以外的部位为移植细胞提供免疫豁免环境.最近的研究还表明支持细胞分泌的多种活性物质对其他细胞有促进作用.但至今其分离纯化方法还不完整,且细胞纯度不太理想.目的:探讨一种获取高纯度睾丸支持细胞的方法.方法:迅速分离出生后20 d雄性SD大鼠睾丸生精小管,采用酶消化法将细胞悬液接种于多聚赖氨酸包被的培养板内培养7 d后,采用Tris-HCL低渗缓冲液处理生精细胞和成纤维细胞,采用FasL免疫组织化学、Hoechst33342复染鉴定睾丸支持细胞的纯度.结果与结论:支持细胞贴壁性比较强,培养24 h后,大多数细胞开始贴壁,细胞形状呈圆形或椭圆形,培养液中漂浮着较多生精细胞.培养48 h后,胞质逐渐增多,折光性减弱.三四天后支持细胞胞质铺展,细胞间隙变小.4～6 d后胞质完全铺开,细胞相互连接,铺展成膜状单层.此时,质核比为(7～9):1,细胞为多边形,其形态和胞质面积不再改变;睾丸支持细胞的纯度为(95.64±2.76)%.结果证明该方法是一种相对简便易行且经济、稳定、有效的睾丸支持细胞分离方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	麦海星	解放军军事医学科学院附属医院泌尿外科	1	10	1.0	1.0
2	陈立军	解放军军事医学科学院附属医院泌尿外科	1	10	1.0	1.0
3	曲楠	解放军军事医学科学院附属医院泌尿外科	1	10	1.0	1.0
4	赵立	解放军军事医学科学院附属医院泌尿外科	1	10	1.0	1.0
5	黄晨	解放军军事医学科学院附属医院泌尿外科	1	10	1.0	1.0
6	王亚林	解放军军事医学科学院附属医院泌尿外科	1	10	1.0	1.0