LeftyA蛋白对转化生长因子β1所致肾小管上皮细胞纤维化的影响

• 作者: 姚颐 张杰 方立 李万强 李又空
• 来源期刊: 中华小儿外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: LeftyA蛋白 肾小管间质纤维化 转化生长因子β
• 年，卷（期）: 2010,（8）
• 页码范围: 612-616
• 分类号: R72
• 字数: 4399字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-3006.2010.08.013

摘要

目的 观察LeftyA蛋白对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)纤维化的影响,并初步探讨其作用机制.方法 体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2)细胞,通过LipofectamineTM2000介导基因转染及药物筛选构建LeftyA蛋白稳定表达HK-2细胞系;TGF-β1(10ng/ml)刺激此细胞系,于0、6、12、24、48h通过Western blot分别检测E-钙粘蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及p-Smad2/3的表达变化,通过Real-time PCR检测Ⅰ型胶原(ColⅠ)及结缔组织生长因子(CTGF)基因的表达变化.结果 不同浓度的TGF-β1刺激24 h后HK-2细胞内E-eadherin、α-SMA蛋白的变化均表现出明显的剂量效应,而当TGF-β1浓度达到10ng/ml时,α-SMA蛋白合成达到平台期(P＞0.01),因此本实验中以10ng/ml的TGF-β1作为刺激剂量;TGF-β1(10 ng/ml)刺激HK-2细胞6 h可引起E-cadherin表达下降(P＜0.01),刺激24 h后可诱导其合成表达α-SMA(P＜0.05),同时细胞内ColⅠ基因转录增加(P＜0.01);正常HK-2细胞内没有p-Smad2/3的表达,TGF-β1(10 ng/ml)刺激30min即可诱导其激活表达,并在1 h时迅速达到高峰,其后开始下降;高表达LeftyA蛋白能够减轻TGF-β1所致上皮细胞转分化(EMT)及纤维化的程度,降低p-Smad2/3的表达高峰,并抑制CTGF的表达(P＜0.01).结论 LeftyA蛋白能够通过抑制TGF-β1所致Smad2/3磷酸化及CTGF表达发挥抗肾小管上皮细胞纤维化的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张杰	武汉大学人民医院泌尿外科	283	1497	19.0	26.0
2	姚颐	武汉大学人民医院泌尿外科	65	213	8.0	10.0
3	方立	武汉大学人民医院泌尿外科	6	15	2.0	3.0
4	李万强	武汉大学人民医院泌尿外科	6	14	2.0	3.0
5	李又空	武汉大学人民医院泌尿外科	14	40	4.0	5.0