人胚胎视网膜色素上皮细胞在微孔聚酰胺纳米纤维膜上的培养

• 作者: 唐罗生 李筠萍
• 来源期刊: 眼科研究
• 学科: 医学
• 关键词: 视网膜色素上皮细胞 Bruch膜 微孔聚酰胺纳米纤维膜 细胞培养 组织工程
• 年，卷（期）: 2010,（11）
• 页码范围: 1014-1019
• 分类号: R774.01
• 字数: 4555字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-0808.2010.11.002

摘要

目的 研究人胚胎视网膜色素上皮(RPE)细胞在微孔聚酰胺纳米纤维膜(EPN)上的生长和分化情况,观察EPN能否作为一种理想的膜性支架而支持RPE细胞的生长和分化,为后续Bruch膜替代物的研究奠定基础.方法 将培养的人胚胎RPE细胞分别以5×105/cm2的密度种植在EPN和常规塑料(对照组)的Transwell植入物的24孔培养板中,低钙培养基(Ca2+浓度0.1mmol/L)中培养,待细胞贴壁生长后,改用正常钙培养基(Ca2+浓度1.8mmol/L)培养4周.用相差显微镜每天观察2组细胞的形态及生长情况;分别以免疫荧光染色及Western blot法鉴定RPE细胞中CK-18、细胞连接蛋白ZO-1及RPE65的表达,观察培养的RPE细胞遗传表型的维持情况.结果 培养在EPN上的RPE细胞与对照组一样,能够较好地贴壁生长,形成单细胞层.EPN较常规塑料更适于RPE细胞贴附生长.EPN的纤维排列类似Bruch膜内胶原层纤维排列.EPN上培养的人胚胎RPE细胞CK-18表达阳性,与对照组相比,ZO-1和RPE65均呈较强表达,较好地保持了原代RPE细胞的表型.结论 生长在EPN上的人胚胎RPE细胞能够较好地生长、分化并形成单细胞层,有效地维持了原代RPE细胞的表型.为后续Bruch膜替代物组织工程学研究提供了新的思路.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐罗生	中南大学湘雅二医院眼科	204	794	12.0	19.0
2	李筠萍	中南大学湘雅二医院眼科	14	45	4.0	6.0