猪瘟病毒云南毒株的分离鉴定及E2基因的原核表达

• 作者: 初晓辉 孙永科 杨亮宇 杨忠良 杨玉艾 毕保良 郑欢莉
• 来源期刊: 畜牧兽医杂志
• 关键词: 猪瘟病毒 分离鉴定 原核表达
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 1-5
• 分类号: S815
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-6704.2010.03.001

摘要

从云南10个地州15个大型猪场采集到的21份样品中分离得到5株猪瘟病毒.经测序鉴定昆明、玉溪、曲靖地区分离株的核苷酸序列99.99%同源,大理和宝山地区的核苷酸序列99.99%同源,5株分离毒均属于基因二群.5株分离毒在PK-15细胞上的平均毒价约为2×106 TCD50/mL,应用荧光抗体染色可以检测到CSFV.通过RT-PCR扩增猪瘟病毒约1 200 bp的E2蛋白全部抗原编码区序列,并将其分别克隆到pMD18-T载体中.序列分析结果表明,5株分离株的E2基因片段为1173bp,与猪瘟病毒Shimen株的核苷酸同源性为82.5%和84.3%,与C-株的核苷酸同源性分别为83.3%和85.4%.将E2基因插入原核表达载体pET-41a(+),转化进BL21(DE3)内进行表达,经IPTG诱导,E2蛋白能在菌体内高效表达,表达量达26.5%,蛋白分子质量约为41kD.本研究为猪瘟诊断抗原及基因工程疫苗的研制打下基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨玉艾	云南农业大学动物科学技术学院	44	195	8.0	12.0
2	杨亮宇	云南农业大学动物科学技术学院	67	360	9.0	16.0
3	初晓辉	云南农业大学动物科学技术学院	40	418	11.0	19.0
4	毕保良	云南农业大学动物科学技术学院	64	184	9.0	11.0
5	孙永科	云南农业大学动物科学技术学院	34	142	7.0	10.0
6	郑欢莉	云南农业大学动物科学技术学院	7	14	2.0	3.0
7	杨忠良		1	0	0.0	0.0