采用易错PCR对粘质沙雷氏菌几丁质酶C进行定向进化

• 作者: 刘嘉 刘治江 施腾鑫 李红然 贺淹才
• 来源期刊: 华侨大学学报（自然科学版）
• 关键词: 粘质沙雷氏菌 几丁质酶C 分子定向进化 易错聚合酶链反应 包涵体
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 学术论文
• 页码范围: 58-64
• 页数: 7页
• 分类号: Q786|Q550.3
• 语种: 中文

摘要

以重组E. coli BL21(DE3) pLysS /pET22b-Chi C为亲本,采用易错聚合酶链反应(PCR)技术,对粘质沙雷氏菌几丁质酶C基因(Chi C)进行定向进化研究.经过两轮易错PCR后,建立突变体文库,进行平板初筛、包涵体复性及酶活检测复筛,获得一酶活较高的突变酶(Mut-Chi C),其催化活性为亲本重组酶的1.9倍,比活力为出发菌酶活的3.3倍.对突变酶的酶学性质进行初步研究,其最适pH值为5.0,最适温度为60 ℃,而出发菌该酶的最适温度为40 ℃.进化酶基因经DNA测序并通过软件与亲本型酶基因进行分析比对,表明突变酶Mut-Chi C基因发生点突变,使4处氨基酸被取代,且均为有义突变.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贺淹才	华侨大学工业生物技术福建省高等学校重点实验室	32	308	11.0	16.0
2	李红然	华侨大学工业生物技术福建省高等学校重点实验室	5	35	3.0	5.0
3	刘嘉	华侨大学工业生物技术福建省高等学校重点实验室	12	49	4.0	6.0
4	施腾鑫	华侨大学工业生物技术福建省高等学校重点实验室	5	18	3.0	4.0
5	刘治江	华侨大学工业生物技术福建省高等学校重点实验室	6	36	4.0	6.0