重组创伤弧菌溶细胞素诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的作用及其机制

• 作者: 丁卉 严杰 杨军 楼永良 王波 谢旦立 赵志超
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: 创伤弧菌 溶细胞素 人脐静脉内皮细胞 凋亡 caspase
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 103-108
• 页数: 6页
• 语种: 中文

摘要

为了研究重组创伤弧菌溶细胞素(rVvhA)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡的作用及其机制.采用MTT法、普通光学显微镜和电子透射电镜、流式细胞仪结合Annexin V-PI标记法、caspase活性检测等方法测定rVvhA诱导HUVEC凋亡的作用.结果显示rVvhA能够抑制HUVEC生长.3.0溶血单位(HU)/ml和4.0 HU/ml的rVvhA作用HUVEC 8h后,细胞和线粒体的形态发生凋亡改变.其中4.0 HU/ml处理组的凋亡率(51.73±1.96)%高于对照组(3.53±0.64)%和3.0 HU/ml处理组(12.83±5.00)%,具有剂量依赖性;4.0 HU/ml rVvhA诱导HUVEC凋亡过程中,caspase-3、caspase-9活性增加,并且具有时间依赖性,而caspase-8活性没有明显改变;4.0 HU/ml rVvhA加caspase-3抑制剂Ac-DEVD-FMK或caspase-9抑制剂Ac-LEHD-FMK的凋亡率分别下降到(14.2±3.47)%、(24.93±3.93)%.同时caspase-3、caspase-9活性也下降.结果表明rVvhA具有诱导HUVEC凋亡的生物学活性;其机制可能与依赖caspase的线粒体途径有关.