基因Ⅶ型新城疫病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 冯莉莉 刘华雷 刘文华 孙军峰 常娓娓 张维 王志亮 赵云玲 郑东霞
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 新城疫病毒 基因Ⅶ型 荧光定量RT-PCR
• 年，卷（期）: 2010,（11）
• 页码范围: 1447-1452
• 分类号: S852.659.5
• 字数: 4280字
• 语种: 中文

摘要

根据基因Ⅶ型新城疫病毒F基因裂解位点特征设计一对引物和TaqMan探针,建立一种敏感、特异、重复性良好的基因Ⅶ型毒株荧光定量RT-PCR鉴别检测方法.以体外转录法制备的cRNA标准品为标准阳性模板,构建标准曲线,并进行各项指标的检测.结果表明,建立的方法特异性良好,最低可检测到102拷贝·μL-1的模板RNA,敏感性比普通RT-PCR高100倍.本试验建立了基因Ⅶ型新城疫病毒荧光定量RT-PCR检测方法,且该方法能够鉴别检测常规方法不能区分的新城疫病毒基因Ⅶ型强毒株,表明本研究建立的方法可用于此种基因型毒株的快速鉴别检测.