云斑尖塘鳢肿大细胞病毒属虹彩病毒的分离与鉴定

• 作者: 刘春 吴淑勤 常藕琴 曾伟伟 李凯彬 潘加雄 王庆 石存斌
• 来源期刊: 水生生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 云斑尖塘鳢 虹彩病毒 肿大细胞病毒 MCP
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 1150-1156
• 分类号: Q941
• 字数: 4173字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1035.2010.01150

摘要

2009年10月,广东顺德地区一云斑尖塘鳢养殖场暴发不明病因疾病,发病尖塘鳢体长15-18 cm不等,死亡率约85%,濒死尖塘鳢从池塘底层游至水面,呈现游动失衡状态直至死亡.死亡尖塘鳢腹部膨大,剖检可见肝脏、脾脏、肾脏肿大,有出血斑点,从内脏器官肝脏、脾脏和肾脏未分离到致病菌.病鱼内脏组织研磨过滤除菌后,腹腔注射20尾尖塘鳢,7d后开始出现死亡,10d后全部死亡,对照组无死亡.自然发病鱼和人工感染鱼的病理切片显示肝脏、脾脏和肾脏出现大量肿大细胞,超薄切片经电子显微镜观察,肝脏、脾脏和肾脏观察到大量病毒颗粒.电镜下病毒呈六边形,直径约135 nm,形态与虹彩病毒相似.针对虹彩病毒主衣壳蛋白(Major capsid protein,MCP)序列设计引物,提取自然发病鱼和人工感染鱼的DNA作为模板,均能扩增出预期大小的特异性产物.利用NCBI的Blast搜索,结果显示扩增序列与肿大细胞病毒属的传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)、闪电丽鱼虹彩病毒(DGIV)和条石鲷虹彩病毒(RBIV)MCP核苷酸序列同源性分别为98.8%、98.1%和94.7%.利用MCP序列构建的系统发育树显示,导致云斑尖塘鳢发病死亡的病毒为肿大细胞病毒属虹彩病毒,暂命名云斑尖塘鳢虹彩病毒(MSGIV).